三代测序的基本原理、组装方法和应用场景
PB/Nanopore测序原理及优缺点介绍
PB:光信号,荧光基团结合碱基测序Nanopore:电信号优点
无GC偏好性缺点
错误率较高有效孔只有三分之一三代测序组装方法
参考文献:Comprehensive evaluation of non-hybrid genome assembly tools for third-generation PacBio long-read sequence data常用软件
Canu
纠错、修剪、组装FALCON(PB自主开发)
可做二倍体和单倍体可通过Hi-C数据对二倍体进行组装MECAT文献结论
三代测序应用场景
基因组
测序优势
可价格低contig数量,减少后续拼接与注释的工作量,节省时间提高了基因组组装的完整度算法
OLCDBG表观遗传学(甲基化)
总量鉴定高通量测序宏基因组全场转录本全长16S二代+三代组装分析比较
Nanopore组装效果比较好优势
基因全面组装N50效果好binning高质量基因组